原代細(xì)胞分離培養(yǎng)都有哪幾種方法？

　　研究中常用的細(xì)胞系/株系是現(xiàn)成的，我們只需要進(jìn)行細(xì)胞傳代和種子保存。然而，這些細(xì)胞系往往因長期體外培養(yǎng)而失去原有的生物學(xué)特性，對藥物治療的反應(yīng)差距越來越大。因此，越來越多的人選擇原代細(xì)胞。來源于胚胎、組織、器官和外周血，經(jīng)特殊分離方法制備的原代培養(yǎng)細(xì)胞稱為原代細(xì)胞。原代細(xì)胞培養(yǎng)，也稱為原代培養(yǎng)，是從供體獲得的組織細(xì)胞在體外的培養(yǎng)。

　　

　　原代細(xì)胞是接近和最能反映體內(nèi)生長特性的細(xì)胞，適用于藥敏試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。原代細(xì)胞分離培養(yǎng)都有哪幾種方法？

　　

　　1、組織培養(yǎng)法

　　

　　組織培養(yǎng)是一種常見、簡單且成功的原代細(xì)胞分離培養(yǎng)方法。基本方法是將切下的小組織塊接種到培養(yǎng)瓶（或培養(yǎng)皿）中。瓶壁可預(yù)先涂上一層薄薄的膠原蛋白，以利于組織團(tuán)粘附在瓶壁上，使周圍的細(xì)胞沿瓶壁向外生長。

　　

　　2、消化培養(yǎng)法

　　

　　組織消化法是將組織切成小塊（或糊狀），通過酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用，使細(xì)胞間的橋接結(jié)構(gòu)進(jìn)一步松散，使團(tuán)塊由團(tuán)塊變成絮狀。此時(shí)，采用機(jī)械法用稻草吹散細(xì)胞團(tuán)塊，或在搖瓶中進(jìn)行電磁攪拌或搖動(dòng)，使細(xì)胞團(tuán)塊充分分散，制成少量細(xì)胞團(tuán)塊和大量單細(xì)胞細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞易貼壁生長。

　　

　　3、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

　　

　　懸浮生長的細(xì)胞，如胸水和腹水中的白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞，不需要被消化。可以低速離心分離直接培養(yǎng)，也可以用淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　

　　4、器官培養(yǎng)

　　

　　器官培養(yǎng)是指從供體獲得的器官或組織塊在體外特定環(huán)境條件下不進(jìn)行組織分離的培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可以保持器官和組織的相對完整性，可用于觀察細(xì)胞之間的連接、排列和相互作用，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)。